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TIANScript Ⅱ RT Kit (KR107)

廠家:天根生化科技(北京)有限公司
  目錄號 規 格 價 格
KR107-02 20μl×100次 1680元
KR107-01 20μl×25次 500元

產品簡介:

本試劑盒提供了所有的用于cDNA第一鏈合成的試劑,其中的TIANScriptRTase為改良后的莫洛尼氏鼠白血病病毒反轉錄酶(M-MLV),改良后的新RTase具有更高的模板親和力和更低的RNase H活性,因此使其在cDNA第一條鏈的合成過程中具有通讀復雜二級結構模板和反轉錄長片段cDNA的能力。產品中配備的5×TIANScriptRTase Buffer經過精心的優化,既保證了新型RTase的高效酶活,又拓寬了RNA模板量的加入范圍,使得反轉錄出來的cDNA具有更好的質量以便用于后續的實驗分析。

 

產品特點:

■ 酶活效率高:高效的反轉錄酶活性,后續實驗兼容性好。

■ 底物范圍廣:適用于所有RNA,尤其是具有復雜二級結構的RNA 模板。

■ 反轉片段長:cDNA 第一鏈合成可以達到12 kb。

■ 操作簡單:只需一步添加所需成分,無需中間加入任何試劑。

 

適用范圍:

1. cDNA第一鏈的合成;

2. cDNA文庫的構建;

3. 一步法RT-PCR;

4. RACE分析。

 

注意事項:請務必在使用本試劑盒之前閱讀此注意事項。

1. 用于cDNA合成反應的溶液試劑盡可能用DEPC進行處理,并在高壓滅菌后使用。有些試劑不能高壓滅菌時,首先用經過滅菌的器具、水等配制溶液后,再將溶液進行濾除菌處理。

2. RNA樣品要避免基因組DNA污染;

3. 避免反復凍融RNA,使RNA保持在冰浴中處融化狀態;

4. 試劑盒中各組分成分應在-20保存;

5. 在使用Random Primer時,要注意隨機引物量和總RNA量之間的關系,一般建議50 ng隨機引物/5 ugRNA。當提高Random/RNA的比率將會提高短片段(~500 bpcDNA的合成;而當降低Random/RNA的比率將會提高長片段cDNA的合成;

6. 如果模板RNA富含二級結構,可以先在65條件下處理5min;

7. 如果反轉錄中使用PCR下游引物,為了防止引物錯配導致的非特異擴增,可以在50條件下進行反轉錄;

8. 在進行長片段擴增時,為了防止cDNA結果被破壞,建議以70下處理15 min為酶滅活條件;

9. 當使用酶類時,應輕輕混勻,避免起泡;分取之前要小心地離心收集到反應管底部,由于酶粘度高,吸取時應慢慢吸取。

注意:如果要擴增長片段,需使用新鮮提取所得的完整性好、純度高的RNA。

 

儲存條件

本產品中的各成分可在-20條件下保存1年。



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